目的: 通过测定乳块消制剂中重金属及有害元素以及砷（As）的形态,对As元素风险进行评估。方法: 采用微波消解法结合电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法,对78批次乳块消制剂中铬（Cr）、镍（Ni）、铜（Cu）、As、镉（Cd）、汞（Hg）、铅（Pb）7种重金属及有害元素进行测定;采用高效液相色谱串联电感耦合等离子体质谱（HPLC-ICP-MS）法,对As的6种形态进行研究;并采用危害指数（HI）对10批次样品中的As进行风险评估。结果: 2种方法的线性关系、精密度、重复性、回收率均良好;7种重金属检测结果显示,各厂家不同批次之间元素差异较大。对E公司生产的10批次样品的As形态、价态进一步分析显示,乳块消制剂中总As含量偏高,通过HPLC-ICP-MS法测得其均为毒性较大的三价As和五价As。HI<1,结果相对安全可控。结论: 建立的7种重金属及有害元素以及6种As形态的含量测定方法高效快速,准确性、稳定性良好,可为乳块消制剂中重金属及有害元素限量标准制定提供数据参考。

目的: 建立一种适用于甘精胰岛素及其生物类似药抗药抗体检测的单一生物分析方法。方法: 以生物类似药作为捕获抗原和确证试验中的竞争抗原,偶联过氧化物酶的重组蛋白A/G作为检测试剂,建立酶联免疫分析方法,从抗原等效性、筛选临界点、滴度临界点、确证临界点、灵敏度、精密度、选择性、钩状效应、稳定性和系统适应性方面进行方法学验证。结果: 经抗原等效性（滴定相似性与抑制相似性）交叉验证,生物类似药和参照药与阳性抗体结合能力相似;筛选临界值因子为1.186,滴度临界值因子为1.454,确证临界值为10.7%;筛选试验和确证试验的分析灵敏度分别为8.9 ng · mL^-1和7.7 ng · mL^-1;板内和板间RSD均<20%（确证试验中阴性样本抑制率的板内精密度RSD为20.0%~22.8%除外）;本方法在0.8~6.4 μg · mL^-1之间无钩状效应;样本在室温放置3 h、冷藏（2~8 ℃）1 d以及于-70 ℃冻融4次循环条件下均保持稳定;选择性、耐药性和系统适用性良好。结论: 本研究通过生物类似药和参照药抗原等效性验证,成功建立了一种适用于甘精胰岛素及其生物类似药抗药抗体检测的单一生物分析方法。

目的: 建立超高效液相色谱-三重四极杆质谱（UPLC-QQQ MS/MS）法测定水中10个氨基糖苷类抗生素。方法: 水样经颗粒物碱脱附处理后,添加七氟丁酸与目标物形成离子对,采用UPLC-QQQ MS/MS法进行测定,在Poroshell 120 SB-C₈（100 mm×3.0 mm,2.7 μm）色谱柱上,以1 mmol · L^-1乙酸铵+0.1%（体积分数）甲酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱分离目标物,随后以电喷雾离子源正离子模式电离,多反应监测模式检测,内标法定量。对样品稳定性和存放容器、样品中颗粒物、试液pH、过滤滤膜、样品余氯含量、液相色谱条件等关键性影响因素进行了探讨,并对5类基质的加标水样进行了测定。结果: 样品于4 ℃以下密封、冷藏、避光,至少可保存7 d,且存放容器应为塑料材质;氨基糖苷抗生素易吸附在颗粒物上,需要进行加碱脱附并将滤液调至中性后测定;过滤试样应使用0.22 μm聚丙烯滤膜;余氯会导致目标物损失,采集水样后应立即加入抗坏血酸;优化仪器条件后,方法检测限为1.0~1.7 μg · L^-1,按照标准加入法进行回收试验,除大观霉素在复杂基质中回收率略低（生活污水和工业废水平均回收率分别为42.8%和41.0%）外,其他化合物在所有基质以及大观霉素在纯水、地下水、地表水基质的回收率为60.0%~127.0%,RSD（n=6）为1.3%~16.0%。结论: 本方法各项性能参数满足现阶段环境抗生素监测质控要求,具有实际参考价值。

近年来,依托咪酯滥用问题日益严重。随着依托咪酯被列入管制目录,通过修饰其化学结构合成法律未列管的类似物已成为一种规避监管的新型滥用模式,对公共健康与安全构成严重威胁。面对不断增多的滥用种类,加强对依托咪酯及类似物的监管与检测显得尤为重要。本文在系统总结依托咪酯药理学和毒理学性质的基础上,重点围绕依托咪酯及类似物的构效关系和检测方法进行探讨,以期为依托咪酯的管制策略和分析方法的建立提供参考。

目的: 基于超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法（UHPLC-Q Exactive Orbitrap HRMS法）,对甘露消毒丹的化学成分及其入血成分进行定性研究。方法: 采用UHPLC-Q Exactive Orbitrap HRMS鉴定甘露消毒丹的化学成分。12只雄性SD大鼠随机分为空白组与甘露消毒丹组,甘露消毒丹组按生药量1.8 g · kg^-1进行甘露消毒丹水煎液灌胃,空白组灌胃等体积纯水。灌胃1.5 h后采集血样,采用ACQUITY UPLC HSS T₃色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.8 µm）,柱温40 ℃,以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速0.30 mL · min^-1,进样量6 µL;电喷雾离子源（ESI）,扫描范围m/z 100~1 500,结合对照品数据库信息,在正、负离子模式下对入血成分进行定性分析。结果: 从甘露消毒丹的80%甲醇提取液中鉴定出195个化合物,血清中检测到66个原型成分,并分析了黄芩苷、芹菜素-7-葡萄糖苷、异鼠李素-3-O-半乳糖苷、鹰嘴豆芽素A、28-去乙酰射干醛、车前草苷A、连翘酯苷A、橙黄决明素、新绿原酸、榄香素、芒果苷、川贝酮碱的裂解规律。结论: 该研究实现了甘露消毒丹中多类别体外化学成分及其入血成分的快速表征与鉴定,为其药效物质基础及质量控制研究提供了参考。

目的: 研制重组新型冠状病毒蛋白疫苗（CHO细胞）生物学活性参考品,用于其体外相对效力及小鼠体内效力评价。方法: 选取检定合格的重组新型冠状病毒蛋白疫苗（CHO细胞）原液,经标定蛋白质含量后,加入佐剂制备的疫苗作为候选参考品;候选参考品经成品检验合格后,进行均一性检查;经5次独立试验使用Ⅲ期临床批疫苗制剂对候选参考品进行体外相对效力及小鼠体内效力检项标定;将候选参考品置（37±2）℃、（5±3）℃考察,分析其稳定性;分别应用Ⅲ期临床批疫苗制剂和候选参考品对6批待测疫苗制剂进行体外相对效力和小鼠体内效力适用性测试。结果: 重组新型冠状病毒蛋白疫苗（CHO细胞）生物学活性参考品成品检定项目均符合规定;装量不低于标示量且精确度在±1%以内,粒径大小与分布D10、D50、D90的RSD分别为0.45%、0.39%、0.54%,抗原含量RSD为2.7%;Ⅲ期临床批疫苗制剂标定候选参考品,体外相对效力和小鼠体内效力均不低于0.5,且几何均值均为1.0,体外相对效力和小鼠体内效力几何变异系数（GCV）分别为8.9%、31%;候选参考品在（37±2）℃放置28 d、（5±3）℃放置36个月,体外相对效力及小鼠体内效力无明显上升或下降趋势,表明候选参考品稳定性较好;6批待测疫苗制剂体外相对效力和小鼠体内效力检测结果分布范围分别在0.9~1.0和0.7~1.4,表明候选参考品与原参考品一致性较好。结论: 重组新型冠状病毒蛋白疫苗（CHO细胞）生物学活性参考品,可用于同质重组新型冠状病毒蛋白疫苗（CHO细胞）体外相对效力及小鼠体内效力评价。

目的: 对3家制药用水系统微生物开展监测分析,并初步探索适于制药用水系统微生物传代的培养基。方法: 从3家企业的制药用水系统收集到130株微生物,分别对细菌和真菌采用16S rDNA、ITS rDNA进行测序鉴定,并对检出率较高的同属微生物构建生物进化树进行污染源分析。同时采用3种不同培养基并改进灭菌方式,对上述130株微生物开展传代培养考察。结果: 在3家企业的制药用水系统出现频率较高的微生物主要为甲基杆菌、罗尔斯通菌和慢生根瘤菌。130株微生物传代培养结果显示,R3A和R2A的效果优于胰蛋白胨大豆琼脂培养基。通过改进培养基的灭菌方式,将R3A中的磷酸盐和琼脂分别高压灭菌后再混合,部分在RXA（R2A和R3A）培养基生长较慢的微生物的生长速度可以得到提高。结论: 制药用水系统微生物具有一定的普遍性。RXA培养基可能更适合于制药用水系统微生物的传代培养,对于部分易受氧化应激影响的微生物,可改进培养基的灭菌方式促进生长。

目的: 建立超高效液相色谱串联质谱（UHPLC-MS/MS）法同时测定明目蒺藜丸中13个成分（蒺藜皂苷K、盐酸黄柏碱、欧前胡素、异欧前胡素、升麻素苷、蒙花苷、毛蕊花糖苷、甘草苷、汉黄芩素、栀子苷、木犀草苷、芍药苷、黄芩素）的含量。方法: 采用Waters Acquity BEH C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.7 µm）,柱温40 ℃,以乙腈-5 mmol · L^-1甲酸铵（含0.1%甲酸）为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL · min^-1,进样量1 µL;质谱条件为电喷雾（ESI）离子源,多反应监测（MRM）正、负离子扫描模式。结果: 13个化学成分在各自的浓度范围内线性关系良好（r>0.999 0）;精密度、重复性和稳定性良好;加样回收率在93.7%~110.0%,RSD在0.28%~9.7%;13批明目蒺藜丸样品中上述13个成分的含量范围分别为11.94~75.55、66.88~156.32、57.18~87.83、18.57~27.68、20.20~196.20、230.73~485.25、539.71~3 061.53、24.30~87.02、314.32~973.51、297.45~1 736.38、61.45~473.48、397.44~1 275.18、331.81~4 091.77 µg · g^-1。结论: 该方法高效、简便,准确度高,重复性好,可为提升明目蒺藜丸的质量标准提供依据。

目的: 建立超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱（UPLC-QQQ MS）,为芪蛭通络胶囊的定性鉴别提供一种快速、简便的方法。方法: 采用Waters ACQUITY^TM UPLC,Hss T3 C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.8 μm）,柱温35 ℃,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL · min^-1,在正、负离子模式下对色谱流出物进行质谱检测。结果: 特征图谱共确立32个共有特征峰,分别来自13味药材,其中23个特征成分经与对照品对比,确认结构。10批制剂中32个特征色谱峰相对保留时间的RSD均<1.0%,表明32个特征峰在样品中稳定存在。结论: 建立的液相色谱-质谱联用（LC-MS）特征图谱简便、灵敏、准确,可较为系统地反映芪蛭通络胶囊的化学组分特征信息,同时也为芪蛭通络胶囊的快速鉴别提供了新的方法。

目的: 雄黄作为常用中药,其安全性主要受三价砷[As（Ⅲ）]的影响。本研究旨在建立一种快速、灵敏的检测方法,用于测定雄黄中As（Ⅲ）的含量,为其安全使用提供保障。方法: 通过水热法合成铁-钴层状双氢氧化物（Fe-Co-LDH）与过渡金属碳化物（MXenes）的纳米复合材料,并用其修饰玻碳电极（GCE）制成新型传感器（Fe-Co-LDH-Mxene/GCE）。采用扫描电子显微镜（SEM）和X射线衍射（XRD）对材料进行表征,通过电化学方法系统评价传感器在不同溶液条件下的性能,并考察其稳定性与重复性。结果: 成功制备了具有特殊层状结构的纳米复合材料。该传感器在中性水溶液中对As（Ⅲ）表现出优异的检测性能,其响应信号与As（Ⅲ）浓度在100~500 μg · mL^-1范围内呈良好的线性关系,且具有出色的稳定性和重复性。在实际雄黄样品检测中应用良好。结论: 本研究开发的电化学传感器能够在中性条件下快速、准确地检测雄黄中的As（Ⅲ）,具有操作简便,灵敏度高等优点,为含雄黄中药的质量控制提供了一种新的检测手段。

目的: 基于ICH Q14分析方法开发指南的分析质量源于设计（AQbD）理念,开发LC-MS方法测定抗体药物中月桂酸、肉豆蔻酸和油酸3个游离脂肪酸的含量,并进行方法学验证。方法: 首先设定分析目标概况（ATP）,结合文献及实验室经验,选择超高效液相色谱（1290 UHPLC）与单四极杆质谱（MSD）联用仪进行方法开发。从样品预处理到LC-MS检测,将操作步骤中可能影响分析方法性能的因素全部列出,同时评估其对分析方法准确度和精密度的潜在影响。在控制策略上,对高风险/高成本因素进行控制,对色谱柱、流动相、梯度洗脱或等度洗脱、柱温和质谱仪的毛细管电压、碎裂电压和雾化器压力进行试验,开发适用于聚山梨酯（吐温）降解产物的定量分析方法,并按照ICH Q2要求进行方法学验证。结果: 经方法学验证,上述基于LC-MS技术的游离脂肪酸含量测定方法,其月桂酸、肉豆蔻酸和油酸加标回收率为82.3%~106.6%,线性范围为0.01~2.00 μg · mL^-1,最低定量限低于0.01 μg · mL^-1,抗体制剂中的蛋白和辅料成分无干扰。应用该方法分别测定有效期内和过期的抗体制剂,以及在研的2组抗体制剂强降解样品中的月桂酸、肉豆蔻酸和油酸含量。在强降解样品中发现月桂酸、肉豆蔻酸和油酸含量均显著升高,提示存在聚山梨酯降解。说明所开发的方法性能符合ATP的预设要求,可用于不同抗体药物中游离脂肪酸的定量检测。结论: 本文提供了一个应用AQbD理念开发LC-MS方法的案例,通过控制试验材料、测量过程与操作规范,对质谱仪气体和电压等参数的允许范围进行实验验证,最终方法的质谱参数是一个范围而不是某一个确定的数值,这对于方法的生命周期,特别是变更管理很有价值。所开发的方法可用于抗体中吐温降解产物游离脂肪酸的定量。同时,此案例对LC-MS方法用于药物质量控制具有较好的借鉴意义。

目的: 利用基因膜芯片技术,建立化妆品及原料中6种致病菌快速共增菌培养和检测方法,提升产品的生物安全保障能力和风险筛查效率。方法: 使用共增菌培养基培养出大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、乙型副伤寒沙门菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和洋葱伯克霍尔德菌6种致病菌,设计6种致病菌特异性引物及探针,对样品核酸进行多重PCR扩增,进一步利用基因膜芯片技术进行产物杂交并分析判定。结果: 特异性测试表明,6种致病菌仅在其对应靶点显色,4种阴性模板菌（单增李斯特菌、蜡样芽胞杆菌、创伤弧菌、志贺菌）均未显色,无交叉反应,探针特异性良好。引物浓度为 0.20/0.30 μmol · L^-1（内参）,0.067~ 0.75 μmol · L^-1（6种靶标）时,各靶标显色强度均一。所建立的方法对6种致病菌的检测限均可达1.0× 10⁵ copies · mL^-1。9批样品的检测结果与传统检测结果均为阴性,加标样品均能特异性检出对应靶标,且无交叉干扰,满足日常检验要求。结论: 建立了6种致病菌的共培养方法及基于PCR-基因膜芯片技术的多重检测方法,该方法特异性强,稳定性好,灵敏度高,可保障化妆品及原料的质量安全,也可进一步应用于化妆品工厂和市场的化妆品检测,丰富了化妆品行业中致病菌的检测方法,提供了快速有力的技术检测手段。

目的: 优化并验证白喉棒状杆菌C7（β197）（简称C7）菌株检验中特异性中和试验方法,以提高结果判读的清晰性,并缩短检测时间。方法: 将C7菌株以宽、窄不同方式接种,滤纸条置于培养基表面或埋入培养基内部,筛选蛋白胨A Elek培养基、蛋白胨B Elek培养基、蛋白胨C Elek培养基、蛋白胨D Elek培养基、蛋白胨E Elek培养基、营养琼脂培养基、市售Elek培养基等7种培养基,将白喉抗毒素配制为2 000、1 500、1 000和500 Lf · mL^-1等4种浓度,用15、25和35 mL培养基倾注平板,C7菌株接种在距离滤纸条3、5、7、9、11 mm处,在基础培养基中加入马血清或牛血清,系统优化、筛选了C7菌株特异性中和试验的关键条件,并对优化后的方法进行专属性和重复性验证。结果: 确定了C7菌株以窄的方式接种、滤纸条置于培养基表面、用蛋白胨C Elek培养基作为中和培养基、用1 500 Lf · mL^-1白喉抗毒素浸润滤纸条、用15 mL培养基倾注平板、菌株接种在距离滤纸条3 mm处、在基础培养基中加入牛血清等为适宜的特异性中和试验条件。验证结果表明,优化后的方法具有良好的专属性与重复性。结论: 本研究优化的特异性中和试验方法稳定可靠,显著提升了C7菌株结果判读的清晰性与检测效率,为该菌的实验室鉴定及相关疫苗质量控制提供了更为高效、可靠的技术支持。

目的: 建立高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）法同时测定消毒产品中31种化学药物的含量。方法: 采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.8 μm）,柱温30 ℃,以0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈溶液作为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL · min^-1,进样量2 μL;采用电喷雾正、负离子切换多反应监测（MRM）模式检测。结果: 31种化学药物可在13 min内实现专属的分离和检测,检测限0.05 mg · kg^-1,线性范围0.125~2.5 mg · kg^-1,与峰面积均呈良好线性关系,r>0.99,加标回收率为73.2%~114.0%,RSD≤12.2%（n=6）。结论: 该方法快速、准确,灵敏度高,专属性强,可同时对消毒产品中31种化学药物开展检测,为消毒产品监管提供技术参考。

本文围绕抗体药物质量标准中的质控项目,系统综述了当前的分析技术与研究进展,涵盖大小异质性、电荷异质性、糖异质性、生物学活性（结合/功能活性测定,以及报告基因法等技术方法）、辅料含量、蛋白含量、肽图分析及宿主残留杂质检测等质量属性,详细阐述了相应技术的检测原理、方法开发要点及适用场景。同时,介绍了翻译后修饰表征中多属性监测技术（MAM）的技术优势、开发要点与应用进展。本文梳理的抗体药物质控方法体系与技术进展,可为抗体药物的质量标准建立、质控方法优化、稳定性研究等提供参考,助力抗体药物研发生产的质量控制与监管水平提升。

目的:研究依托咪酯及其结构类似物美托咪酯、丙帕酯和异丙帕酯体外人肝微粒体代谢规律。方法:在人肝微粒体孵育模型中分别添加4个目标物,在37 ℃下恒温孵育1 h后加入冰乙腈终止反应,离心后取上清液氮吹挥干后复溶,处理后的样品采用超高效液相色谱-高分辨质谱ESI⁺模式检测,以0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液为流动相,采用Waters HSS T₃色谱柱,运用IDA扫描模式对目标物原型及其代谢产物进行检测,探索代谢途径。结果:4个物质主要涉及脱烷基、脱氢、氧化、葡萄糖醛酸结合等生物转化途径。在3例毛发阳性样品中均检测到依托咪酯、美托咪酯和异丙帕酯原型,同时检出相同的脱烷基化代谢产物和羧酸形成产物。此外,还检出2个物质的特征代谢产物（依托咪酯和异丙帕酯的丢失苯乙基代谢产物M3）。结论:推荐使用依托咪酯原型及其代谢产物M3、美托咪酯原型、丙帕酯原型及其代谢产物M3、异丙帕酯原型及其代谢产物M3分别作为摄入这4个目标物的生物标志物。

目的:建立基于报告基因法（RGA）的细胞系及检测方法,用于地舒单抗的生物学活性测定。方法:通过转基因技术将含有RANK基因的质粒和含有NF-κB-RE荧光素酶报告基因的质粒转入HEK293细胞系,建立RANK-GloResponse NF-κB-RE-luc2P HEK 293细胞系。对细胞密度、显色方法、RANK配体（RANKL）的用量、地舒单抗稀释梯度等进行摸索后建立方法,根据2020年版《中华人民共和国药典》四部通则9101与9401,对方法的准确度、精密度、线性范围、专属性和耐用性进行考察。结果:成功建立报告基因法检测地舒单抗生物学活性,该方法的效价水平64%~156%的相对偏移（RB）均在±12.0%范围内,回归方程斜率为1.047 6,相关系数为0.988 1;精密度与准确度最大RSD为15.0%,对不同细胞代次、细胞密度及培养时间等考察耐用性的几何变异（GCV）最大为7.9%。细胞传代稳定性证实细胞传代在30代内P均>0.05。结论:本研究成功构建了基于报告基因法的细胞系,开发了适用于地舒单抗生物学活性检测的分析方法,且通过方法学验证,可为相关生物制品的质量控制提供可靠的技术支持。

目的:建立了一种优化的bFGF活性测定方法——肝素钠稀释法,以提高对含肝素钠制剂的检测生理相关性与方法稳定性。方法:在2025年版《中华人民共和国药典》四部附录3527方法基础上,于样品稀释步骤中引入含肝素钠的维持培养液并将细胞饥饿时间缩短至5 h。用该方法与药典方法分别检测含肝素钠与不含肝素钠的bFGF制剂,比较2种方法的差异。结果:对含肝素钠制剂,肝素钠稀释法曲线拟合度（0.998±0.001）和剂量效应区间（0.449±0.070）显著高于药典法曲线拟合度（0.995±0.00 2） （p<0.01）和剂量效应区间（0.295±0.039） （p<0.000 1）,EC₅₀值（0.419±0.088）显著低于药典法（0.627±0.154）（p<0.000 1）,2种方法测得标示量无显著差异,肝素钠稀释法线性范围良好;对不含肝素钠制剂,2种方法均满足r>0.9且平行性良好,但肝素钠稀释法测得标示量（146.78%±10.0%）显著高于药典法（90.65%±2.8%） （p<0.001）。结论:肝素钠稀释法提高了含肝素钠制剂四参数回归计算法的拟合质量、灵敏度与方法稳定性,适合作为药典法的有效补充。研究结果为bFGF制剂的质量控制提供了更科学、可靠的检测思路。

目的：分别建立反相高效液相色谱（RP-HPLC）法和双波长分子排阻高效液相色谱（SEC-HPLC）法,有效分析模拟偶联断裂抗体偶联药物（ADC）制剂的偶联情况,搭配紫外分光光度（UV）法测定蛋白浓度有望满足制剂分析的需求。方法：采用未断裂的ADC、小分子和抗体3个成分物理混合,建立模拟发生部分偶联断裂的A组制剂以及与A组制剂总抗体和总小分子浓度相同的无断裂发生的对照B组制剂;建立UV法,在252 nm和280 nm波长下测定A组制剂和B组制剂的吸收度,利用朗伯-比尔定律计算药物抗体偶联比（drug-to-antibody ratio,DAR）来体现ADC制剂的总抗体浓度和偶联情况;采用Zorbax Ellipse XDB-C₁₈色谱柱（50 mm×2.1 mm,3.5 μm）,柱温35 ℃,以0.1%三氟乙酸-水为流动相A,以0.08%三氟乙酸-乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速0.5 mL · min^-1,进样器温度5 ℃,检测波长252 nm,建立RP-HPLC法,检测制剂内断裂后产生的游离小分子,间接地分析ADC制剂的偶联情况;采用凝胶TSK G3000SWXL色谱柱（7.8 mm×30 cm,5 μm）,柱温室温,以15%异丙醇和85%磷酸盐缓冲液（0.2 mol · L^-1磷酸钾,0.25 mol · L^-1氯化钾,pH=7.0）为流动相,流速0.5 mL · min^-1,进样器温度5 ℃,检测器波长252、280 nm,建立双波长SEC-HPLC法,通过测定相应峰面积直接计算ADC制剂的DAR。结果：UV法测定A组制剂和B组制剂的抗体总浓度（n=3）分别为5.14 mg · mL^-1和5.04 mg · mL^-1,DAR（n=3）分别为3.45±0.03、3.47±0.02;RP-HPLC法可以有效检测A组制剂中模拟断裂掉的游离小分子,而B组制剂中不存在;双波长SEC-HPLC法测定A组制剂和B组制剂的DAR分别为1.83、3.65。结论：UV法可以准确地检测此种模拟偶联断裂ADC制剂的抗体浓度,但无法有效地检测出制剂的偶联状态;RP-HPLC法可以检测此种模拟偶联断裂制剂的游离小分子,间接地证明制剂中模拟偶联断裂的发生;双波长SEC-HPLC法可以有效、准确地检测此种模拟偶联断裂制剂的偶联状态,搭配UV法测定蛋白浓度有望满足制剂分析的需求。

目的:建立了基于QuEChERS前处理技术同时测定小鼠血中5种尼秦类物质的超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）。方法:样本采用甲醇：乙腈（1 ∶ 3,体积比）提取,MgSO₄脱水,以XSelect HSS T₃色谱柱（2.1 mm×100 mm）进行色谱分离,正离子多反应监测（MRM）模式检测,以甲醇-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱。结果:血中5种尼秦类物质在0.1~100 ng · mL^-1范围内线性关系良好,相关系数均>0.999 0。方法检出限为0.4~2.0 pg · mL^-1,定量下限为1.3~6.3 pg · mL^-1,加标回收率（n=6）为89.4%~110%,相对标准偏差（RSD）为3.9%~6.3%。结论:该方法具有灵敏、准确、操作性强的优点,可用于血液中5种尼秦类物质的检验,为涉毒案件提供科学依据。